HLA-B27基因检测助力强直性脊柱炎早期诊断

博奥生物

随着网络及媒体的发展，强直性脊柱炎（AS）也越来越多地出现在我们的视野中。从一些著名的演艺明星，到一些普通的患者，都在经历着病痛的折磨。

人类白细胞抗原（HLA）B27是HLA-B位点上的一个重要的等位基因，早在 1973年，相关研究就证实HLA-B27抗原的表达与强直性脊柱炎（AS）有高度的疾病相关性，而且这种相关是迄今己知的HLA与疾病的关联中最强和最典型的。同时，HLA-B27是强直性脊柱炎（AS）实验室检查的重要指标，在强直性脊柱炎患者中阳性率高达90%。

HLA-B27基因检测的意义

早期诊断强直性脊柱炎：AS患者以炎性背痛起病，但影像学骶髂关节并不明显，通过临床症状诊断AS概率为50%，而检出HLA-B27阳性时可到90%。

避免漏诊强直性脊柱炎：有些AS的早期表现是以外周关节炎起病，并不是炎性腰背痛为首发表现。

评判其他类似脊柱关节病（SpA）的危险性，引起高度警惕：银屑病患者出现外周关节或骶髂关节痛；尿道炎患者在出现下肢关节炎以及结膜炎；慢性腹泻、腹痛、便血患者出现关节炎等。

有SpA家族史，直系或2级亲属患有SpA，可达到早期预防：HLA-B27作为等位基因，遗传概率相当大，及早对后代进行检测，可及早预防强直性脊柱炎。

HLA-B27基因分型检测

的不同检测方法

目前，检测HLA-B27的方法主要有微量淋巴细胞毒试验检测法、流式细胞仪分析法、聚合酶链反应-序列特异性引物法、荧光PCR染料法。

微量淋巴细胞毒试验检测法

应用已知抗HLA的特异性标准分型血清与待测淋巴细胞混合，在补体的参与下可以使携带与分型血清型相同抗原的淋巴细胞死亡，判定被检者HLA型别的一种方法。

优点：不需要特殊的仪器，易于操作，一般实验室都可开展。

缺点：该检测方法的影响因素较多，如细胞纯度、补体的活性和差异、抗体的纯度和效价、HLA的高度多态性、细胞表面B27抗原分子表达数目及抗原交叉性、操作者的主观影响等，容易造成假阳性和假阴性的结果。

流式细胞仪分析法

利用荧光标记的HLA-B27单克隆抗体，与细胞表面的B27抗原结合，使结合后的淋巴细胞有一定的荧光强度，由流式细胞仪测得的通道值来反映，以其值的高低判断HLA-B27抗原表达的百分比，从而判断HLA-B27的阴阳性。

优点：如果采用全自动仪器检测，能克服人为误差，重复性较高，结果判断准确。

缺点：使用的仪器昂贵，成本较高，只适合较大医院应用，而且荧光易淬灭，与HLA-B7抗原有一定的交叉反应，容易出现假阳性。此外，该方法必须是新鲜采集的样本才能检测，且样本的前处理过程十分繁杂，难以应对较大样本量的检测。

聚合酶链反应-序列特异性引物法

通过设计基因序列特异的引物SSP，对待测DNA进行PCR扩增，从而获得HLA型别特异性的扩增产物。

优点：标本不受时间限制，陈旧血、冷冻血也可用于DNA的提取；DNA可长期保存以供复核或送其他实验室验证；技术成熟，判断结果客观准确，特异性强，灵敏度高，稳定性好。

缺点：该方法检测的是HLA-B27的基因型，携带B27基因并不等于细胞表面一定有HLA-B27抗原的表达；需要有专业的实验室及人员。

荧光PCR染料法

在PCR反应液加入荧光染料，该染料能与双链DNA特异性结合，通过实时检测反应体系荧光信号强度，达到检测PCR扩增产物的目的。

优点：直接检测HLA-B27抗原的编码基因，不会与HLA-B7产生交叉反应，能准确的作出判断；与测序方法相比符合率达到100%，与流式细胞术方法相比符合率达到98%以上；可以采用新鲜血液、陈血和冻存血液，灵活安排抽血时间和检测时间。

缺点：该方法需要在PCR实验室进行，需要有专业的实验室及人员。

总体来说，荧光PCR染料法对HLA-B27进行基因分型，此方法具有很大的优点，操作简便、灵敏度高、特异性强、准确性高、结果稳定，更适合于临床应用。

人类白细胞抗原B27核酸检测试剂盒

（荧光PCR染料法）

（国械注准：20173401345）

本试剂盒采用荧光PCR染料法，该方法是荧光定量PCR的一种，在PCR反应液中加入荧光物质，实时监测反应体系中荧光信号强度，通过溶解曲线对HLA-B27扩增产物进行分析，计算内对照（管家基因）与HLA-B27溶解曲线荧光信号峰值的比值，通过比值来确定样本的阴阳性。

产品特点

✦ 灵敏度高：

新型染料Super Green的使用，相比SYBR Green大大提高了信号强度，因而提高了灵敏度。

✦ 特异性高：

高效Hot Start Taq DNA 聚合酶的使用，抑制非特异性产物的产生，提高结果特异性。

✦ 准确性高：

自动化仪器检测与优良的软件算法相结合，去除人为因素干扰，增强结果判读的准确性和可靠性；
实验结果直接通过电脑软件判读，避免人工判读误差避免与等位基因B7的交叉反应，提高强直性脊柱炎早期诊断的准确率；
与测序方法相比符合率达到100%，与流式细胞术方法相比符合率达到98%以上；
可以采用新鲜血液、陈血和冻存血液，方便医生灵活安排抽血时间和检测时间。

适用人群

有强直性脊柱炎家族史人群；
有腰背部疼痛和僵硬等主要症状，以休息后加重和活动后缓解为主要特征的人群；
有颈、胸、腰背、臀部、髋关节等全身多处疼痛肿胀的人群；
有脊柱驼背畸形和脊柱强直的人群；
有突发眼痛、眼红、畏光、流泪等症状的人群；
皮肤有银白色鳞屑并伴有手足小关节、腕关节受累或中枢关节受累；
体检人群。

专利证书

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（工作日 08:00-18:00）

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